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摘要：建立并驗證小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法學,研究人臍帶間充質干細 胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)單次靜脈注射后在重度免疫缺陷 NOG 小鼠體內的組織 分布情況。目的 建立并驗證小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法學,研究人臍帶間充質干細 胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)單次靜脈注射后在重度免疫缺陷 NOG 小鼠體內的組織 分布情況。>>>商務洽談，點此處，在線咨詢

方法 建立小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA 的 RT-qPCR 分析方法,進行標準曲線與線性范圍、準確度 與精密度、穩(wěn)定性等方法學驗證。 取 NOG 小鼠 36 只,雌雄各半,單次靜脈注射給予 HUCMSCs 3. 5 × 10 7 cells/ kg, 于 6、12、24、72 h、1 周、2 周各取 6 只小鼠麻醉,采集血液(EDTA 抗凝)后解剖,取肺、腎、心臟、肝、大腦、脊髓、胃、小 腸、脂肪、皮膚、脾、睪丸(子宮、卵巢)提取 DNA,用已驗證的小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA RT-qPCR 分析方法測 定各組織中 HUCMSCs 的分布情況。 另選取 NOG 小鼠 18 只,雌雄各半,分為對照組 6 只、給藥組 12 只,分別靜脈注 射 0. 9%氯化鈉注射液、HUCMSCs 3. 5 × 10 7 cells/ kg,給藥期間觀察小鼠急性毒性反應情況,給藥組于給藥后 72 h、 2、4 周各取 4 只動物剖檢觀察臟器組織大體觀情況,取肺組織石蠟切片采用免疫組化法檢測線粒體蛋白表達,分析 HUCMSCs 在肺組織中的定植情況。

結果 建立的小鼠組織中人源 SRY 基因 DNA 的 RT-qPCR 分析方法各考察指 標均符合驗證標準;NOG 小鼠單次靜脈注射 HUCMSCs 后,主要分布于肺和血液中(給藥后 1 周內),肺組織濃度高 于血液,肺組織、血液中 HUCMSCs 濃度分別在 6 ~ 24 h、6 ~ 72 h 之內維持相對平穩(wěn)水平,之后隨時間推移下降,其 他組織各采樣點均未測得 HUCMSCs 分布;定植結果顯示靜脈注射 HUCMSCs 后 72 h 可在肺部檢測到其存在,2 周 和 4 周時則未檢測到;單次靜脈注射 HUCMSCs 后 NOG 小鼠未見明顯急性毒性反應。

結論 建立的 HUCMSCs 小 鼠組織中分布分析方法可靠、可行;NOG 小鼠單次靜脈注射 HUCMSCs 后主要于給藥后 1 周內分布于肺和血液,72 h 主要定植于肺組織;單次靜脈注射 HUCMSCs 具有良好的安全性。

閱讀原文：人臍帶間充質干細胞單次靜脈注射NOG小鼠組織分布及其分析方法學研究.pdf

來源：中國實驗動物學報2023年第12期

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